Царица Небесная велела основать в Дивееве на месте Своего явления преподобной Александре два Рождественских храма. Церковь Рождества Пресвятой Богородицы устроена под храмом Рождества Христова в 1830 году. По заповеди преподобного Серафима Саровского в ней горит неугасимая лампада перед храмовой иконой и читается неусыпаемая Псалтирь.
Роспись выполнена художниками из творческой мастерской Дмитрия Трофимова «Царьград» (г. Москва) и посвящена земной жизни Пресвятой Богородицы и истории Дивеевской обители. Свод храма позолочен. В церкви Рождества Богородицы, как и предсказано преподобным Серафимом, почивают мощи преподобных жен Дивеевских - Александры (Мельгуновой), Марфы (Мелюковой) и Елены (Мантуровой).
На северной стене храма помещены иконы деисусного чина из кельи преподобного Серафима. В алтаре правого придела находится могила протоиерея Василия Садовского, которому незадолго до своей кончины батюшка Серафим завещал духовное окормление дивеевских сестер. В алтаре левого придела - могила Михаила Васильевича Мантурова. В советское время в церкви Рождества Богородицы был овощной склад. 22 июля 1991 года храм передали монастырю. Повторно его освятили 21 октября 1992 года.